https://www.happycampus.co.jp/public/tags/%E9%9B%BB%E6%B0%97%E6%B3%B3%E5%8B%95/ タグ“電気泳動”の公開資料 ja-JP happycampus rss generator https://www.happycampus.co.jp cs@happycampus.co.jp cs@happycampus.co.jp Copyrightⓒ 2002-2026 AgentSoft Co., Ltd. All rights reserved Fri, 25 Nov 2022 13:27:09 +0900

ゲル電気泳動 ゲル電気泳動ゲルでんきえいどう、英: gel electrophoresisは、高分子DNA、RNA、タンパク質とそのフラグメント断片を、その大 きさや電荷に基づいて分離および分析する方法である。臨床化学では、タンパク質を電荷または大 きさで分離するために用いられ、生化学および分子生物学では、DNAおよびRNAフラグメントの混 合種個体群を長さで分離したり、大きさを推定したり、タンパク質を電荷で分離するために用いら れる。 核酸分子は負に帯電しているため、電場を印加してアガロースまたは他の物質のマトリックスを通 して移動させることで分離される。短い分子は、長い分子よりもゲルの細孔..]]> Fri, 25 Nov 2022 13:26:13 +0900

電気泳動 電気泳動でんきえいどう、英: electrophoresisは、荷電粒子あるいは分子が電場..]]> Wed, 08 Feb 2012 19:29:45 +0900

第一セメスター月４　 ※レポート課題 　タンパク質について、学んだこと、興味を持ったこと、やってみたい研究してみたい、もっと知りたいことを自由に述べる。 　蛋白質というと非常に多くの種類や研究分野があり、漠然としたイメージしかありませんでした。 第Ⅰセメスターでは蛋白質に関する講義を多く受けましたが、思ったことは、蛋白質の研究と言ってもいろいろな観点があり、医学や薬の研究は結局のところ、何らかの形で蛋白質を扱うんだろうなということです。 　高尾先生の講義で特に興味深かったものに、質量分析法を用いて特定の蛋白質を検出することでそれをバイオマーカーとして病気の診断や拒絶反応の予知が可能になるという..]]> Thu, 17 Feb 2011 18:33:52 +0900

ポリアクリルアミドゲル電気泳動 ○目的 　SDSポリアクリルアミド電気泳動を行うことにより，タンパク質の分離に関する原理を学び、タンパク質の分子量の測定や純度の検定ができるようになること。 ○方法 　まず、ガラスプレートそれぞれのゲルに接する面をエタノールでよく拭き、汚れを取り乾かしておいた。次に、密着用のシリコンガスケットをスペーサーの付いたガラスプレートに装着し、切り込みのあるガラスプレートを重ねて大型のクリップで固定した。このとルの高さに目印として油性ペンで印をつけておいた。分離用ゲルは、100mlのビーカーに以下の割合で混合した。 ・24%アクリルアミドゲル溶液　　　　　　　　　　　　　　　3.0ml ・2M　Tris-HCl (pH8.7)　分離用ゲル緩衝液　　　　　　　　 1.4ml ・10％　SDS溶液　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 70μl ・10％　過硫酸アンモニウム　　　　　　　　　　　　　　　 45μl ・N,N,N’,N’-テトラメチルエチレンジアミン(TEMED)　　　　 20μl ・蒸留水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2.5m..]]> Sat, 27 Nov 2010 21:36:40 +0900

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PCRによる個体識別 目的 PCR法を行い、各自の毛根細胞から抽出した染色体DNAを鋳型としてD１S80領域の選択的増幅を行い、ポリアクリルアミドゲル電気泳動を用いた増幅断片長の解析を行う。 実験方法 教科書Ⅵ‐58頁からⅥ‐64頁までの方法に従って行った。 ただし、一部変更があったため、その箇所を以下に示す。 Ⅵ‐61　３‐１　(２)　0.5 mlチューブ→エッペンドルフチューブ サーマルサイクラー→ヒートブロック 　　Ⅵ‐62　３‐２　(２)　0.5 mlチューブ→0.2 mlチューブ ミネラルオイルを１滴ずつ加える→加えなかった 実験結果 　３－１．電気泳動の結果とその解析 　　以下に各自のDNA増幅断片を電気泳道にかけた結果を示す。 ＜マーカー＞ 　　マーカーのサイズと、その移動距離を表１に示す。マーカーサイズの対数をとったものをY、マーカーの移動距離をXとして、グラフ(図１)を描き、そこから検量線を作成した。ただし検量線作成の際、マーカーサイズ1057 bpと770 bpの点は除いた。 　　　　　　　　　　表１．マーカーサイズとその移動距離 サイズ(bp)　　 1057　 7..]]> Wed, 12 May 2010 00:20:48 +0900

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遺伝子工学基礎実験 ＜実験操作＞ DNA断片の分離（3日目） プラスミドDNAの制限酵素による切断 　以下の溶液を順に混合した。 プラスミドDNA溶液 制限酵素用緩衝液(H Buffer) 制限酵素(EcoRⅠ) 制限酵素(XhoⅠ) 　　　　混合後37℃で30分間反応させる。 　　 アガロースゲル電気泳動 ２）のアガロースゲルの作成と同様にして電気泳動用アガロースゲルを作る。次に制限酵素反応溶液を2ウェルに分けて入れ、マーカーDNA溶液とともに流した。 　 DNA断片の分離・精製 　　 電気泳動終了後、ゲルをトランスイルミネーター上で、カッターを使ってインサート、ベクターを別々に切り出した。それぞれ重さを量ったエッペンチューブにとり、再びエッペンチューブごと重さを量り、入れたゲルの重さを算出した。ゲル1mgにつき1μlのcapture bufferを加えボルテックスでよく混合し、ゲルが完全に溶けるまで60℃で保温した。 　　 完全に溶けたサンプルをFlashした後、GFXカラムをチューブにセットし、サンプル溶液全量をカラムに入れ、そのまま室温で1分間置いた。カラムを13000rpmで..]]> Tue, 16 Feb 2010 22:31:11 +0900

キャピラリー電気泳動による顔料の分離について 1.条件 №1~4 : 10mMCTABに飽和させた。 №5 : メタノールに飽和させた。 上の条件で電気泳動を行った。 2.結果 №1, 4, 5:おおむね良好なピークが得られた。 №2, 3:ピークがきれいにでない。 3.考察 今回の実験では、まず№1~5 の物質をうまく分散させることのできる溶媒の調査か ら行った。その結果、№5 はメタノールのみによく分散することがわかったので、泳 動溶液はメタノールを用いた。また、№1 は CTABによく分散する。従って、分散に 成功したので適切に電気泳動を行うことができたといえる。しかし、CTABにあまり よく分散していなかった№4 の電気泳動ができ、№4 よりもよく分散していた№2 と№ 3 の電気泳動ができなかったという結果から、実験がうまくいかなかったことと分散 の程度には必ずしも関係があるとは言い切れない。 では、№2と№3の失敗についてどのようなものだったかということを考えてみる。 この二つについては、実験がうまくいかなかったため 2 回実験を行った。その 2 回の ..]]> Fri, 05 Jun 2009 14:10:04 +0900

卵白リゾチームの精製 　　　　 １、直接結晶化法によるリゾチームの精製 ２、イオン交換体法を使ったリゾチームの精製 ３、ミクロコッカス菌体を使った活性測定 ４、電気泳動法による純度の検討 ５、リゾチームの結晶化[309]
　 卵白リゾチームの精製 　　　　 ＜実験結果＞ 直接結晶化法によるリゾチームの精製 1週目　11/6(木)　気温　23.0℃　　水温　23.0℃　　気圧　1015.4 hPa フィルムケースにはかり取った卵白、粉末NaClは以下の通りである。 卵白　　　　　5.058 g 粉末NaCl　　 0.254 g 混合後２N NaOH溶液ａを1滴＋α（2滴目は少量壁面を伝わせて加えた）加え、pH試験紙でpH9.5になったことを確認した。溶液のpHを調節した後、結晶種20μlを加え冷蔵庫に保存した。 2週目　11/13(木)　気温　19.4℃　　水温　19.2℃　　気圧　1017.9 hPa 生じた結晶を偏光顕微鏡で観察した。観察された結晶の形状を図1－1に示す。 得られた溶液の収量は以下の通りであった。 マイクロチューブの重量　　　　1.018g 試料の入ったマイクロチューブの重量　　　　1.542g 試料の収量　　　　0.524g 試料溶液80μlをに脱イオン水3920μlを加え(50倍希釈)、280nmにおける吸光度を測定した。Lambert-beerの法則より、 　 A：吸光度、T：..]]> Fri, 05 Jun 2009 01:24:08 +0900

コロイド溶液中のコロイド粒子の周りには拡散電気二重層が存在するため、電場をかけると電気泳動が起こる。電気泳動速度を測定することにより、ζ電位が求められ、またコロイド溶液に電解質を加えるとコロイド粒子の電荷が中和されて凝結が起こる。今回の実験[359]
・要旨 　　コロイド溶液中のコロイド粒子の周りには拡散電気二重層が存在するため、電場をかけると電気泳動が起こる。このとき、粒子のζ電位と電気泳動速度の間に次の関係が成り立つ。 ζ ＝　／　　　　　　（１） （η：分散媒の粘度、ｕ：電気泳動速度、ε：誘電率、：電圧勾配） したがって電気泳動速度を測定することにより、ζ電位が求められる。 　　またコロイド溶液に電解質を加えるとコロイド粒子の電荷が中和されて凝結が起こる。今回の実験では水酸化鉄（Ⅲ）のコロイド溶液を用いてζ電位を測定し、さらにこのコロイド溶液の凝結価を塩化カリウムならびに硝酸カリウム溶液を用いて調べる。 ・実験方法 (1)水酸化鉄（Ⅲ）コロイド溶液の作成 塩化鉄（Ⅲ）溶液（30%）を作り、沸騰させた蒸留水200 mlに塩化鉄(Ⅲ)溶液5 mlを加えた。不純物を取り除くために、この溶液をセロファンの袋に入れ、一昼夜透析を行い水酸化鉄（Ⅲ）コロイド溶液を作成した。 　(2) ζ電位の測定 翌日、分液ロート中にこのコロイド溶液をいれた。コックを開いてＵ字管の底部にコロイド溶液が入るのがわずかに確認できたら直ちにコックを閉じ、底部のコ..]]> Fri, 01 May 2009 07:43:13 +0900

「たばこ依存に関連する遺伝子多型」 Introduction 　たばこを吸う人は大勢いるが，多くのひとが喫煙をやめようと試みたことがあるだろう。健康増進法の影響もあってかたばこに対する風当たりは強くなり，さらにはたばこ税の大幅な値上げも[328]
]]> Thu, 04 Dec 2008 09:47:45 +0900

実験1葉緑体と系Ⅱ膜断片の調製 結果 ホウレンソウから抽出した葉緑体のクロロフィルの定量を行い,4つに分けて652,665,750(nm)での吸光度を測定した.この時,キュベットの向きを誤ってしまい,光路長が通常の1cmではなく,約0.5c[298]
]]> Thu, 06 Nov 2008 20:39:25 +0900

SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動によるタンパク質の分離 1.実験結果 タンパク質 分子量 泳動距離（cm） Phosphorylase b 97200 1.3 Bovine serum albumin 66400 1.8 Ovalbum[208]
]]> Sat, 21 Jun 2008 18:57:11 +0900

分子生物学実験 ＜目的＞ 遺伝子の増幅と解析の原理と方法を理解するとともに、具体的な手法を身につける。 ＜原理＞ カラーセレクションの原理 クローニングベクターであるpBluescriptは制限酵素EcoRIによってMCS部が切断[302]
]]> Fri, 09 Nov 2007 20:54:31 +0900

【目的】 色素法によって、血清タンパク質濃度およびアルブミン濃度を調べること。また、AG比を求め血清タンパク質の詳細を学ぶ。 【方法・結果】 ~色素法によるアルブミン/グロブミン比測定~ a) ブランク(水)、アルブミン標準液、検液(ウ)、[328]
【目的】 色素法によって、血清タンパク質濃度およびアルブミン濃度を調べること。また、AG比を求め血清タンパク質の詳細を学ぶ。 【方法・結果】 ~色素法によるアルブミン/グロブミン比測定~ a) ブランク(水)、アルブミン標準液、検液(ウ)、検液(エ)を25µlずつそれぞれ2本ずつ試験管に入れ、それぞれに発色試薬を5.0ml加えた。すると黄色である発色試薬が、アルブミン標準液と検液(ウ)では黄緑色に、検液(エ)では緑色になった。 b) それらを混和し25℃で35分間放置後、ブランクを対照として630nmで比色、それぞれの吸光度を測定した。 吸光度　 平均 ブランク引いた吸光度 ブランク(水) 0.095 0.0845 ブランク(水) 0.074 アルブミン標準液 0.462 0.484 0.3995 アルブミン標準液 0.507 検液(ウ) 0.477 0.487 0.348 検液(ウ) 0.497 検液(エ) 0.770 0.739 0.60 検液(エ) 0.708 c）検体(ウ)、検体(エ)のアルブミン濃度を求めた。 アルブミン濃度(mg/ml) ＝ {(検液の吸光度) / (標準..]]> Sun, 01 Jul 2007 11:40:28 +0900

１．表題　分子生物学　基礎実験　そのⅠ ２．目的 細菌やカビがもつ、染色体とは独立に自己複製を行う核外遺伝子であるプラスミド。このプラスミドについて今回の実験では、プラスミドベクターと外来遺伝子を挿入したプラスミドベクターを用いて形質転換の[356]
１．表題　分子生物学　基礎実験　そのⅠ ２．目的 細菌やカビがもつ、染色体とは独立に自己複製を行う核外遺伝子であるプラスミド。このプラスミドについて今回の実験では、プラスミドベクターと外来遺伝子を挿入したプラスミドベクターを用いて形質転換の実験とプラスミド調製の実験を通して形質転換とプラスミド調製の原理を知る。制限酵素で調製したDNAを切断し、アガロースゲル電気泳動で目的DNA断片（外来遺伝子）を確認する実験を通して制限酵素の意義を理解し、アガロースゲル電気泳動の原理を知る。 ３．材料と方法 Ⅰ．形質転換 材料：LB培地、アンピシリン（Amp）、0.1M塩化カルシウム、SOC培地、 X-gal（β―ガラクトシダーゼにより分解され青色に発色）、 IPTG（lacリプレッサーに結合し、LacZプロモーターからのLacZの転写を誘導するオペロンにおける誘導体として機能する。代謝によって分解されないので、ラクトースの代わりに使用する） pUC19（α断片をコードする遺伝子の途中にMCSがあり、このMCSの向きがpUC18とは逆になっている。Amp耐性遺伝子を持つ） pUC(3HBDH)19（p..]]> Wed, 13 Jun 2007 02:56:16 +0900

蛋白分画　実習日2007/06/06 目的 血清蛋白分画は日常の検査法として現在広く行われている分析法である。本実習では、蛋白質の荷電状態の差を利用した電気泳動法を、電気浸透現象の少ないセルロースアセテート（ＣＡ）膜を用いて行う。 試薬 保[332]
蛋白分画　実習日2007/06/06 目的 血清蛋白分画は日常の検査法として現在広く行われている分析法である。本実習では、蛋白質の荷電状態の差を利用した電気泳動法を、電気浸透現象の少ないセルロースアセテート（ＣＡ）膜を用いて行う。 試薬 保存用バルビタール緩衝液(pH8.6、0.12M、イオン強度0.10) 使用バルビタール緩衝液(pH8.6、0.07M、イオン強度0.06) 染色剤(ポンソ3R染色液) 脱色液(2%酢酸) 器具 定電流発生装置（ATTO V-C STABLIZER SJ-1061） 泳動槽（常光　52B　1114号） デシトグラフ(ATTO AE-6905C) ＣＡ膜（富士フ..]]> Fri, 19 Jan 2007 10:33:55 +0900

DNA実験 １、目的　制限酵素処理したDNAと未処理のDNAを用いて電気泳動を行い、その移動差を測定する。この移動差がプラスミドDNAのどのような違いに基づくものかを推定する。また、実験結果から制限酵素によりベクターがどのような作用を受けた[334]
DNA実験 １、目的　制限酵素処理したDNAと未処理のDNAを用いて電気泳動を行い、その移動差を測定する。この移動差がプラスミドDNAのどのような違いに基づくものかを推定する。また、実験結果から制限酵素によりベクターがどのような作用を受けたかを調べる。 ２、材料と方法 　Ⅰ制限酵素処理 　　　まずマイクロピペットを用いて、プラスミドDNAを4μℓ、10x制限酵素用バッファーを2μℓ、H2Oを13μℓ、制限酵素１μℓをマイクロチューブに入れる。プラスミドDNAはa,bの２種類。制限酵素はEcoRⅠ、PstⅠの２種類を用意した。それぞれの組み合わせにより４種類のサンプルを作った。 １…a/Ec 2…a/Ps 3…b/Ec 4…b/Ps それぞれのサンプルは軽く撹拌して数秒程度遠心して37℃の恒温槽で1時間反応させた。反応させている間にアガロースゲルの作製を行った。 　Ⅱアガロースゲル電気泳動 　　ア、アガロースゲルの作製 　　　　0.6ｇのアガロースの入った三角フラスコに泳動バッファー50ml加えて電子レンジで温めた。約60℃になったところでゲル作成台に流し込み約30分間放置した。ゲルが..]]> Tue, 12 Dec 2006 12:15:44 +0900

植物からのDNAの抽出 実験日 6月8日、9日 目的 植物組織からのDNA抽出に広く使われているCATB法で、遺伝子導入タバコと野生型タバコの2種類からDNA抽出を行う。電気泳動により、DNAの抽出を確認する。 実験材料 ・0.5M EDT[292]
植物からのDNAの抽出 実験日 6月8日、9日 目的 植物組織からのDNA抽出に広く使われているCATB法で、遺伝子導入タバコと野生型タバコの2種類からDNA抽出を行う。電気泳動により、DNAの抽出を確認する。 実験材料 ・0.5M EDTA ・CTAB ・クロロフィルム/イソアミルアルコール ・イソプロピルアルコール ・80％エタノール ・βメルカプトエタノール 5M NaCl ・TE ・抽出バッファー（2％CATB、1.4M NaCl、20M EDTA、100mM Tris-HCl(8.0)、100mM βメルカプトエタノール） 実験方法 遺伝子導入タバコと野生型タバコのそれぞれの葉1枚を乳鉢に入れ、抽出バッファーを2ml加えた。乳棒でよくすりつぶした。 次のように試薬を調整し、マイクロピペッターでエッペンチューブに1ml入れた。 10% CATB 600μl 5M NaCl 840μl 0.5M EDTA 120μl 1M Tris-HCl(8.0) 300μl 14.4M β-メルカプトール20μl 滅菌水1120μl 恒温層を使い、60℃で15分保温した。 1mlのクロロフォ..]]> Sun, 31 Jul 2005 17:16:34 +0900

◇考察 今回の実習で用いたPD-10カラムは通常はタンパク質溶液からの脱塩やバッファー交換に用いられるセファデックスG-25を小さなカラムに詰め込んだものである。分子量5000以上の物質と1000以下の低分子を分けられる。今回の実習ではタ[322]
[1]ゲル濾過によるタンパク質の分離・精製 ◇結果 〈標準液〉 ウェル記号 タンパク質濃度[mg/ml] 標準液Ⅰ 標準液Ⅱ 平均 A 1.6 0.330 0.395 0.363 B 0.8 0.170 0.154 0.162 C 0.4 0.112 0.090 0.101 D 0.2 0.050 0.086 0.068 E 0.1 0.043 0.060 0.052 F 0.0 0.000 0.021 0.011 G 0.0 0.000 0.022 0.011 H 0.0 0.023 0.022 0.023 〈試料溶液〉 試験管番号 吸光度 タンパク質濃度[mg/ml] 1 0.020 0.00 2 0.027 0.04 3 0.023 0.00 4 0.197 0.85 5 0.254 1.09 6 0.153 0.61 7 0.037 0.11 8 0.043 0.11 9 0.048 0.13 10 0.038 0.09 11 0.027 0.04 12 0.024 0.00 13 0.022 0.00 14 0.024 0.00 15 0.039 0.09 16 0.030..]]>