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目的 　ＬＤＨは高等動物では、特に心、肝、筋、腎などの組織の上清画分に多く見出されるが、電気的及び反応動力学的性質の異なる５種の分子形（アイソザイム）として存在する。これらは解糖系の調節をする。 　この実験では電気泳動により心臓、肝臓、[352]
〔Ⅱ〕LDHアイソザイム　 2005年12月7日 目的 ＬＤＨは高等動物では、特に心、肝、筋、腎などの組織の上清画分に多く見出されるが、電気的及び反応動力学的性質の異なる５種の分子形（アイソザイム）として存在する。これらは解糖系の調節をする。 この実験では電気泳動により心臓、肝臓、筋肉のアイソザイムを分離観察し、アイソザイムの生理的意義を考察する。 実験手順 　電気泳動法により、５種のLDHアイソザイムを分離、５種類のバンドを確認した。 1)セルロースアセテート膜の準備 　60×80の大きさのセルロースアセテート膜の中心にに原点を設定し、「＋」と「－」の記号、試料の塗布位置、班番号を鉛筆で記入した。 セルロースアセテート膜を静かに緩衝液中に浸して、しばらく放置した後にろ紙で余分な液をふき取り泳動槽に設置した。 2)染色液の調製 ・0.5mol/L 乳酸ナトリウム－0.1mol/Lトリス-HCl緩衝液（pH8.6）　7.5mL ・p-ヨードニトロテトラゾリウムバイオレット 1mg／mL　7.5mL ・PMS 0.16mg/mL －0.1mol/Lトリス-HCl緩衝液（pH8.6)　7.5..]]> Sun, 12 Mar 2006 14:36:25 +0900

目的 　生物のATP合成系には、解糖系での基質レベルのリン酸化系、酸化的リン酸化系、光リン酸化系の３つがあり、いずれも酸化還元反応と共役した系である。 　今回の実習で扱う酵素は、解糖系での基質レベルのリン酸化系のピルビン酸と乳酸間の反応[346]
目的 　生物のATP合成系には、解糖系での基質レベルのリン酸化系、酸化的リン酸化系、光リン酸化系の３つがあり、いずれも酸化還元反応と共役した系である。 　今回の実習で扱う酵素は、解糖系での基質レベルのリン酸化系のピルビン酸と乳酸間の反応を触媒する酵素である。その働きから乳酸脱水素酵素（LDH）と呼ばれる。 　今回の実習では、LDHの活性条件と生体内での反応およびアイソザイムとしての各器官でのあり方などについて実験を通して深く分析、考察する。 〔Ⅰ〕LDH活性の測定　12月6日　室温20℃ 実験手順 分光光度計を用いて340nmの吸光度変化を測定した。 このとき室温は20℃であった。 ●ピルビン酸、NADHを基質とする場合（a、b） ①分光光度計用ガラスセルに下記の試液を正確に加え、撹拌した。 　緩衝液　1.75mL　（a → pH 7 　b → pH10 ） 　酵素液 0.1mL （酵素液は酵素原液をリン酸緩衝液で40倍に希釈したものである。） ②吸光度を「0」に合わせ、2ｍＭNADH試液を0.1mL加え、撹拌した後、吸光度を測定した。 ③0.2mLのピルビン酸ナトリウムをオストワルト..]]>