消化管運動

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資料紹介

2006/11/28-12/01
生理学実習：消化管運動
実験者：windowsxp
共同実験者：Mac
目的：消化管平滑筋の収縮運動は神経性および液性調節を受けている｡本実習ではラット小腸を材料とし､消化管
運動の制御について理解を深める。また、収縮運動における Ca イオンの重要性について確認する。
実験動物：ラット小腸
実験溶液： 145mM NaCl ､5mM KCl ､10mM HEPES ､0 または 1mM CaCl2
1mM MgCl2 ､10mM D -glucose、pH7.4
試薬：アセチルコリン､高濃度 KCl 溶液､カフェイン､ノルアドレナリン、ニフェジピン
実験 1
(１)標本をマグヌス管内に懸垂し(標本の長さは静止時
の約１.2-1.3倍程度にした状態)､10 分程度収縮(等張性
収縮)の変化を観察した(自発性の収縮の観察)。
(２)以下の順に薬物を適用した。
アセチルコリン（0.5μM）（2 回）
高濃度カリウム（60mM ）
カフェイン（１ｍＭ）
ノルアドレナリン（2μM）
アセチルコリン（0.5μM）
留意
(１)マグヌス管内の実験溶液は 30 度に保温し､空気ポ
ンプにより常時通気した(ただし､測定に影響を与えな
い程度)。
(２)薬物の効果を観察するときは､示した終濃度にな
るようにマグヌス管内に加えた｡
(３)適用した薬物を洗浄する場合にはマグヌス管下部
より実験液をすべて抜き取り､上部より保温しておい
た新鮮な実験液を加えた（この操作を 3 回以上繰りか
えした)。
(４)それぞれの薬物適用は 30 秒間程度､洗浄後次の薬
物適用まで 5 分以上とした。
実験 2
(１)実験 1 と同様に標本をマグヌス管内に懸垂し 10 分
程度収縮(等張性収縮)の変化を観察した。
(２)以下の順に薬物を適用した。
1.アセチルコリン（0.5μM）（2 回）
（Ca 含有溶液で Wash）
2.高濃度カリウム（60mM ）
（Ca 除去溶液で Wash）
3.アセチルコリン（0.5μM）
（Ca 除去溶液で Wash）
4.高濃度カリウム（60mM ）
（Ca 含有溶液で Wash）
5.アセチルコリン（0.5μM）
（Ca 含有溶液で Wash）
6.高濃度カリウム（60mM ）
（Ca 含有溶液で Wash）
7.ニフェジピン（1μM）
8.アセチルコリン（0.5μM）
（Ca 含有溶液で Wash し､ニフェジピン添加）
９.高濃度カリウム（60mM ）
（Ca 含有溶液で Wash）
10.アセチルコリン（0.5μM）
（Ca 含有溶液でＷash）
11．高濃度カリウム（60mM ）
結果：
実験 1 の結果は図 1 にまとめた。薬物投与前はいず
れも自発性収縮が見られた。その振幅は約 0.2 ㎜、周
期は 6 秒/回である。a）e）アセチルコリンは強い収縮
を起こし持続時間も長い。3 回の ACh の収縮の形には
特徴があり、はじめ 6 秒程は速やかに収縮したあと緩
やかに収縮してほぼプラトーに達する。b）高濃度カリ
ウムは弱い収縮を起こしすぐに弱く弛緩して徐々にま
た収縮する。c）カフェインは中ぐらいの弛緩を起こし
投与後 20 秒に弛緩が最大になり、その後は収縮弛緩を
繰り返してもとの長さに回復する。d）ノルアドレナリ
ンは中ぐらいの弛緩を起こし、持続時間はカフェイン
より長い。弛緩の形はちょうどアセチルコリンの収